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慢病毒服务

慢病毒介导的方法可将外源基因导入目标细胞系,构建长期稳定表达细胞系。近年来,病毒由于宿主范围广,安全性高,免疫原性低,稳定表达和物理性质稳定等优点,成为世界上作用常用的基因编辑工作,研究细胞通路或者机制的实验室基本都会使用到慢病毒。

慢病毒的由来和基本结构

慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础改造成的一种工具病毒。

穿梭载体

3代慢病毒穿梭载体

 

野生型慢病毒侵染过程

慢病毒感染时,预整合复合体即可转运至核内,因此慢病毒在分裂和不分裂的细胞中都能进行整合

 

改造后的慢病毒产生与比较

变化:1、病毒侵染改为质粒转染;2、没有逆转录过程;3、没有整合发生。

 

改造后的慢病毒侵染与比较

变化:1、不产生病毒基因组RNA;2、不产生病毒包装的相关蛋白;3、不产生新的病毒。

 

慢病毒的作用

慢病毒介导的方法可将外源基因导入目标细胞系,构建长期稳定表达细胞系。近年来,病毒由于宿主范围广,安全性高,免疫原性低,稳定表达和物理性质稳定等优点,成为世界上作用常用的基因编辑工作,研究细胞通路或者机制的实验室基本都会使用到慢病毒。

 

对比

慢病毒和瞬转质粒都可干扰或者过表达某个基因,以RNAi为例有以下几个主要区别:

比较项目 Lentiviral-shRNA DNA载体 shRNA
RNA干扰持续时间 >30天 <10天
适合的细胞系 几乎所有细胞 转染效率达到20%但是可以转代的细胞
构建稳定表达 siRNA的细胞株 满足,可以同时制备多种稳定表达细胞系 满足但有风险