细胞转染效率总是提不上来，方法选对了吗？

转染是细胞实验中广泛使用的技术，通过转染可将外源核酸（DNA、RNA等）引入真核细胞，从而对基因的产物或其功能进行研究，是基因编辑细胞构建必不可少的步骤。然而转染效率不高的问题，总是困扰着许多新手小白，时常也会令颇有经验的细胞培养达人感到头秃。

细胞转染的效率跟哪些因素有关呢？总的来说可以概括为三个方面：

1) 细胞本身：包括细胞的种类、来源和代次等，这些信息基本决定了该细胞是否容易被转染。

2) 转染载体：转染载体的大小、质量和用量也对转染效率有影响，对于不同大小的载体需要优化不同的实验参数或用量，在质量方面需要对质粒的浓度、纯度和构象、RNA是否降解等进行严格的把控。

3) 转染方法和试剂：没有一种转染方法适用所有细胞，对于不同的细胞，选择合适的转染方法和试剂至关重要。其中细胞和载体大家相对来说比较熟悉，今天小源主要从第3点转染方法和试剂着手，给大家进行总结和分享。

首先，我们来盘点一下细胞转染都有哪些方法？按照转染的原理，大致可分为物理介导（如电穿孔法、显微注射法、基因枪法）、化学介导（如磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法、阳离子聚合物介导法等）和生物介导（主要是各种病毒）三类。其中实验室最常用的主要有物理介导的电穿孔法、化学介导的脂质体法和生物介导的慢病毒法。